1. Сбор материала для исследования проводился по сезонам года с осени 2022 по осень 2024 согласно плану исследования. В каждый период сделано по 5 отборов, каждый отбор по 3 пробы. Перед отборами проб в выбранных местах водоема вода помещалась в пробирки и рассматривалась на свету под ручной лупой для обнаружения инфузорий. В осенний, весенний и летний периоды пробы отбирались в прибрежной зоне озера на мелководье, в 3 банки. В банку №1 вода зачерпывалась у самого берега с добавлением листвы и ила со дна, в банку №2 – немного дальше от берега с добавление водных растений, в банку №3 почти на берегу взята кашицеобразная масса и разбавлена озерной водой. Зимние пробы отбирались из - подо льда. После отбора банки с пробами просматривались на свету на наличие ракообразных.
2. Распознавание инфузорий проводилось под микроскопом с помощью определителя и пособия Я.А. Цингера, сделано 5 видеосъемок и 40 фотографий при помощи телефона iPhone 11 через окуляр микроскопа. Для зарисовки исследуемых объектов применялись глицерин и спирт в качестве фиксатора, использовалась технология биологического рисунка.
3. Для проведения экспериментов Paramecium caudatum размножали в искусственной культуре на молочном растворе. Взяли 10 чистых пробирок добавили в каждую около 20 куб. см водопроводной воды и по 2 – 3 капли пастеризованного молока (жирность 1,5%), пробирки взболтали. Затем на предметное стекло поместили 2 – 3 капли жидкости из пробы разбавили водой и при помощи специально оттянутой пипетки под препаровальной лупой отобрали Paramecium caudatum и разлили их по пробиркам. Через 5 дней в верхней части 4 пробирок обнаружены парамеции в виде белых движущихся точек.
4. С Paramecium caudatum проведены эксперименты для изучения морфологии (обнаружение ресничек), физиологии (размножение особей делением,особенности раздражимости). Проведены наблюдения за движением и питанием разных видов инфузорий. Сделаны рисунки, видео и фотографии результатов экспериментов.

• Эксперимент по обнаружению ресничек.

Каплю с парамециями помещают на предметное стекло, прибавляют 1 – 2 капли водного раствора йода, накрывают покровным стеклом и рассматривают при малом, затем при большом увеличении микроскопа. Инфузории окрашиваются в бурый цвет и погибают, по краю тела просматривается каемка из мелких ресничек.

• Эксперимент по изучению деления инфузорий.

Парамеции вылавливаются тонко оттянутой пипеткой под препаровальной лупой и помешаются на предметное стекло. Обнаружение особей находящихся на разных стадиях деления проводится при малом увеличении без покровного стекла. Начальная стадия деления проявляется в изменении формы тела, образовании перетяжки в середине тела особи. На второй стадии перетяжка суживается, просматриваются две половинки клетки, соединенных друг с другом. На последнем этапе перетяжка превращается в тонкий цитоплазматический мостик, дочерние инфузории дергаются и разрывают его, превращаясь в самостоятельные особи.

• Эксперимент по изучению раздражимости (хемотаксиса).

Для изучения отрицательного хемотаксиса на предметное стекло помещается капля с парамециями, а на расстоянии 1 см от нее – капля чистой воды. С помощью отточенной спички соединяются обе капли водяным мостиком. К краю капли с инфузориями прикладывается кристаллик поваренной соли. По мере растворения соли под препаровальной лупой наблюдается переплывание инфузорий по водяному мостику в каплю чистой воды. Не успевшие уйти инфузории гибнут.

5.Биотестирование родниковых вод поселка Зеленоборский с помощью Paramecium caudatum.

Для биотестирования выращиваем культуру парамеций на культивационной (водопроводной) воде с добавлением хлебопекарских дрожжей в качестве корма. Дрожжи сначала превращаем в суспензию (1г на 50 мл водопроводной воды), после набухания суспензию перемешиваем, отстаиваем 1 минуту и 1 мл надосадочной жидкости заливаем в чашку Петри до половины наполненную культивационной водой. На культивационную воду в чашки Пери заселяем тест - организмы Paramecium caudatum и помещаем в термостат (+22±2 °С). Для биотестирования забиралась вода из двух родников. Из родника «Ключ, ручей» на автотрассе Р – 21 Кола 1112 км от Санкт – Петербурга, вода вытекает с большой скоростью. Родник в районе Шандор, в лесной зоне со стоячей водой. Проводилось 3 забора проб воды по каждому роднику (06.06.2024, 08.07.2024, 13.08.2024). Для исследований вод необходим планшет с лунками, в которые помещаем по 10 особей инфузорий из чашки Петри при помощи капиллярной пипетки. Отлавливаем инфузорий под микроскопом. Для каждой пробы родниковой воды должно быть не меньше трех повторностей (30 особей). После помещения инфузорий в планшет в контрольные лунки наливаем по 0,6 мл культивационной (водопроводной) воды без дрожжей, в опытные – по 0,6 мл тестируемой родниковой воды. Отмечаем время начала биотестирования и подсчитываем под микроскопом количество особей в каждой лунке. В процессе опыта ни в контрольных, ни в опытных лунках кормление тест – организмов не проводим. Планшет с заполненными лунками помещаем в термостат и выдерживаем в течение 24 ч при температуре 22±2 °С. По истечении 24 ч производим подсчет выживших и погибших особей под микроскопом. Выжившими считаются инфузории, которые свободно перемещаются в толще воды. Обездвиженных особей относим к погибшим. Экотоксичность исследуемой пробы определяют по смертности инфузорий за 24 часа. Полулетальная токсическая концентрация пробы (ЛК 50-24) вызывает гибель 50% тест-организмов за 24 ч. Безвредная токсическая концентрацию (БК10-24), вызывает гибель не более 10% за 24 ч. Для оценки экотоксичности пробы рассчитываем процент погибших парамеций (А, %). A = Xt /Xi × 100%, где Xi – среднее арифметическое количество исходных особей; Xt – среднее арифметическое количество погибших особей в тестируемой воде через 24 ч.